| Curso |
Doutorado em Biotecnologia |
| Tipo |
Artigo Científico |
| Data |
31/03/2023 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
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| Orientando(s) |
- FERNANDA MOTTA RIBEIRO DA SILVA
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| Banca |
- Carlos Alexandre Carollo
- Cecilia Veronica Nunez
- Denise Brentan da Silva
- Edson dos Anjos dos Santos
- Fernanda Oliveira das Chagas
- Kely de Picoli Souza
- Maria Rita Marques
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| Resumo |
Os fungos são produtores de metabólitos com elevada diversidade e
complexidade estrutural e que são potencialmente bioativos. Os afloramentos
rochosos (AR) que ocorrem na região da borda oeste do Pantanal Sul-matogrossense, Brasil, são locais inóspitos, por isso acredita-se que as espécies
vegetais que existem neste local podem estar adaptadas e em simbiose com
microrganismos que ajudam o seu sistema de defesa. O presente trabalho teve
como objetivo a bioprospecção de metabólitos bioativos de fungos endofíticos
de Bromelia balansae Mez, coletada em AR do Pantanal. Foram isolados 61
fungos endofíticos, sendo que dez foram identificados molecularmente, entre os
quais foram identificados os gêneros: Aspergillus, Penicillium, Diaporthe,
Daldinia e Neodeightonia. Os isolados foram cultivados em meio batatadextrose-ágar (BDA) e em caldo batata dextrose, os extratos orgânicos obtidos
deste cultivo foram avaliados em bioensaios in vitro de atividade antimicrobiana,
antibiofilme, antileishmania e citotóxica. Destes, 25 endófitos apresentaram
atividade antimicrobiana frente a Staphylococcus aureus com CIM (concentração
inibitória mínima) ≤ 500 µg/mL, sendo que 12 destes apresentaram CIM ≤ 125
µg/mL. Nenhum dos microrganismos isolados foi promissor frente a
Pseudomonas aeruginosa. No ensaio com Leishmania infantum quatro cepas
apresentaram índice de infecção menor que 15 % em relação ao controle. Na
avaliação da citotoxicidade frente as linhagens leucêmicas, Kasumi e KG-1,
cinco isolados inibiram mais que 90% do crescimento celular na concentração
de 100 µg/mL. O isolado 5MP2F4, identificado como Penicillium sp., apresentou
CIM de 32 µg/mL frente a S. aureus, e por isso, este foi selecionado para um
estudo utilizando a estratégia OSMAC, triagem antibacteriana e antibiofilme, com
aplicação da metabolômica, análises estatísticas e construção de rede molecular
para determinação de possíveis metabólitos bioativos e compreensão do perfil
químico do fungo. Neste experimento, os extratos obtidos apresentaram
diferentes perfis químicos e potencial antimicrobiano. Diversos metabólitos foram
anotados, dentre eles diferentes brasiliamidas, verruculogeno, fumitremorgina,
ácido penicílico, viridicatum toxina A e espirohexalina. Foi realizado também um
estudo de otimização da extração de micélios fúngicos do isolado 5MP2F4,
utilizando extração acelerada por solvente (ASE), e a viridicatum toxina A (VRA)
foi purificada a partir desta metodologia. VRA foi avaliada quanto a sua atividade
anti-leishmania, antibiofilme e citotóxica frente as linhagens de células
leucêmicas e seu mostrou promissora em todos os experimentos. Os isolados
fúngicos de B. balansae ampliaram o conhecimento da biodiversidade de
endófitos do Pantanal. Foram encontradas diversas substâncias pertencentes a
diferentes classes químicas, algumas foram produzidas em teores elevados
conforme a variação do meio de cultivo, e os bioensaios nos sugerem que estas
possuem potencial como antibióticos e citotóxicos.
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