| AVALIAÇÃO DE CEPAS BACTERIANAS DE Bacillus PARA PROMOÇÃO DE CRESCIMENTO VEGETAL EM DUAS CULTIVARES DE ALGODÃO |
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| Curso |
Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade |
| Tipo |
Tese |
| Data |
12/07/2024 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
- THIANNY FERNANDA CARRELO VIANA
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| Banca |
- Aline Pedroso Lorenz
- Edson dos Anjos dos Santos
- Fabiano Gama de Sousa
- Gecele Matos Paggi
- Gloria Regina Botelho
- Luciana Cristina Vitorino
- Nayara Fernanda Lisboa Garcia
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| Resumo |
A busca e o entendimento das funções de rizobactérias promotoras de crescimento
vegetal e com potencial para biocontrole tem se tornado cada vez mais frequente devido
à necessidade de uma agricultura mais sustentável, com menor uso de insumos químicos
e que geram maior produtividade. O algodão é uma cultura que necessita de um aporte
de nutrientes como nitrogênio, fósforo e potássio que precisam estar disponibilizados no
solo para auxiliar diretamente na qualidade da fibra do algodão. Além disso, há
necessidade do uso de defensivos químicos para controle de doenças encontradas nesta
cultura. A cotonicultura é de grande importância econômica para o país, porém o custo
da sua produção é bastante alto. O presente trabalho tem como objetivo isolar bactérias,
principalmente do gênero Bacillus, de algodoeiro e avaliar os parâmetros de promoção
de crescimento vegetal dos isolados encontrados, assim como observar o potencial dos
isolados em inibir o crescimento de fungos fitopatogênicos de algodão. Amostras de
raízes de algodão foram utilizadas para o isolamento das bactérias. O método de
isolamento utilizado foi o de pasteurização, que seleciona isolados produtores de
endósporos. Os isolados bacterianos foram incubados em meio Ágar Nutriente, no qual
foram repicadas e purificadas para posterior estocagem e avaliações das características
de promoção de crescimento vegetal. Dos 54 isolados bacterianos isolados, 46 foram
sequenciados, sendo 43 Bacillus testados para a solubilização de fosfato de cálcio, a
produção de AIA (ácido indol-3-acético), a atividade da CMCase (carboximetilcelulase)
e a produção de sideróforos. Os isolados bacterianos obtidos foram submetidos a testes
de confronto in vitro para verificar o potencial de inibição de crescimento de
fitopatógenos de algodão. Os halos ao redor das colônias bacterianas foram medidos e
então as taxas de inibição, em porcentagem, foram calculadas. Dos testes bioquímicos
para promoção de crescimento vegetal, foram selecionados isolados bacterianos que
apresentaram resultados significativos para o ensaio in vivo em casa de vegetação com
as cultivares de algodão FM 985 e TMG 47. Os tratamentos foram conduzidos usando 1
mL (108 UFC/mL) de cultura bacteriana e um inoculante comercial como controle,
sendo que para cada tratamento foram utilizadas nove repetições, observadas por 110
dias. Neste experimento, as plantas foram avaliadas quanto aos parâmetros físicos,
fitoquímicos e de macronutrientes. Considerando os parâmetros morfológicos, houve
uma relação positiva entre as cultivares e os tratamentos feitos com bactérias, sendo
observado um aumento da altura, massa fresca da parte aérea, massa seca de frutos e
raízes, volume e comprimento da raiz e número de folhas. Com relação aos parâmetros
fitoquímicos, observou-se melhorias nas concentrações de açúcares totais, ascorbato
peroxidase, compostos fenólicos, aminoácidos livres, açúcar total, clorofila A, açúcares
redutores, flavonoides, catalase e clorofila B. Foi observado que os isolados tiveram
potencial como biocontroladores das doenças estudadas e mostraram resultados
significativos na inibição de crescimento dos fungos patogênicos Corynespora
cassiicola e Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum, com taxas de até 71,89% de
inibição do crescimento dos fungos. Através dos resultados obtidos, foi possível
concluir que os isolados bacterianos possuem características de promoção de
crescimento vegetal, destacando resultado significante no desenvolvimento de raízes,
proporcionado pelo isolado P6T32B7, que além deste destaque também obteve
resultados significantes nos testes feitos na planta. Este isolado tem potencial para que
futuramente sejam realizados testes em campo e possível formulação de produtos. |
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| Desvendando o microbioma bacteriano de Selaginella (Selaginellaceae, Lycopodiopsida) e Dirinaria (Caliciaceae, Ascomycota liquenizados) |
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| Curso |
Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade |
| Tipo |
Tese |
| Data |
07/06/2024 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
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| Coorientador(es) |
- Juliano de Carvalho Cury
- Gecele Matos Paggi
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| Orientando(s) |
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| Banca |
- Aline Pedroso Lorenz
- Ana Paula da Costa Marques
- Andressa Silva Rodrigues
- Geraldo Alves Damasceno Junior
- Marivaine da Silva Brasil Mansur Cardoso
- Meire Aparecida Silvestrini Cordeiro
- Natália Mossmann Koch
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| Resumo |
Com o avanço das técnicas independentes de cultivo, foi possível realizar análises metagenômicas de comunidades microbianas em diversos ambientes. A metagenômica consiste na extração total do DNA de um ambiente, o que permite análises de diversidade, potencial funcional e taxonomia de uma comunidade de microrganismos. Qualquer organismo pode ser estudado pela metagenômica, que tem como objetivo a compreensão da comunidade bacteriana, seus metabólitos e funções. As plantas do gênero Selaginella são conhecidas por suas classes estruturais únicas de produtos naturais e sua ampla gama de efeitos biológicos. São amplamente estudadas na farmacologia devido à presença de metabólitos secundários, como flavonoides, ligninas e os análogos de selaginelina. Os fungos liquenizados são conhecidos por suas propriedades simbióticas e pela produção de metabólitos secundários, sendo utilizados como bioindicadores da qualidade do ar. Apesar do potencial biotecnológico desses dois grupos de organismos, pouco se sabe sobre as associações bacterianas e suas funções em plantas do gênero Selaginella e em fungos liquenizados. Este trabalho tem por objetivo gerar e discutir informações sobre a composição, riqueza e abundância de bactérias associadas a duas espécies de Selaginella (Lycopodiopsida, Selaginellaceae) e duas espécies de fungo liquenizado do gênero Dirinaria (Lecanoromycetes, Caliciaceae). Para tanto, foram selecionadas populações presentes na área rural (Selaginella) e urbana (Dirinaria) de Campo Grande, Mato Grosso do Sul. Os dados metagenômicos foram gerados na Plataforma Ion Torrent (Gene Studio S5) e analisados quanto à sua diversidade com uso do programa Qiime 2. Os principais filos bacterianos encontrados em ambas as espécies de Selaginella foram Actinobacteria, Proteobacteria e Chloroflexi. Os principais representantes a nível de família são Kouleothrixaceae, Pseudonocardiaceae e Sphingomonadaceae. As amostras de raízes exibiram maiores índices de diversidade em comparação com as folhas, com Acidobacteria, Chloroflexi e Verrucomicrobia mais prevalentes nas raízes, enquanto Cyanobacteria foram predominantemente encontradas nas folhas. Não foram observadas variações significativas ao examinar o mesmo órgão entre diferentes espécies de Selaginella. Nas análises de Dirinaria, a composição da comunidade bacteriana entre as duas espécies foi marcada pela predominância de quatro filos: Verrucomicrobia, Proteobacteria, Planctomycetes e Actinobacteria. Além disso, as populações bacterianas que residem nos talos do líquen apresentaram variação em relação às encontradas no substrato, sugerindo um mecanismo seletivo pelo líquen para bactérias específicas, presumivelmente essenciais para seu bem-estar e funcionalidade. |
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| O gênero Stereocaulon (Schreb.) Hoffm. (Ascomycota liquenizados, Stereocaulaceae) em altas montanhas e altas latitudes na América do Sul e na Antártica |
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| Curso |
Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade |
| Tipo |
Tese |
| Data |
11/12/2023 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
- Jean Marc Edson Torres Pineda
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| Banca |
- Aline Pedroso Lorenz
- Bibiana Moncada
- Emerson Luiz Gumboski
- Harrie Sipman
- Manuela Dal Forno
- Marcos Junji Kitaura
- Wellington Santos Fava
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| Resumo |
Stereocaulon (Schreb) Hoffm. é um gênero de liquens tripartido: os talos resultam da associação simbiótica entre um fungo Ascomycota, uma alga verde e uma cianobactéria. Há cerca de 150 espécies aceitas mundialmente, e sua distribuição é cosmopolita, embora a maioria das espécies tenha certa preferência por regiões de altas altitudes e latitudes. Os talos de Stereocaulon são facilmente reconhecíveis em campo, mas a identificação das espécies não é uma tarefa fácil. A alta variabilidade fenotípica intraespecífica é pouco discutida nos trabalhos e pode levar a identificações errôneas. Na Antártica e na América do Sul, os trabalhos são escassos; a maioria dos estudos que avaliam a taxonomia e sistemática do gênero é baseada principalmente em espécimes da Europa, América do Norte e Ásia. Com o objetivo de contribuir ao entendimento da taxonomia e sistemática de Stereocaulon a partir de espécimes provenientes do hemisfério sul, neste estudo foram realizadas análises morfológicas, químicas e moleculares de espécies encontradas na Terra do Fogo e Patagônia (Argentina e Chile), na Antártica, nos campos de altitude do Brasil e nos Páramos andinos da Colômbia. No total foram examinados 920 espécimes de Stereocaulon. Para cada espécie apresentamos informações sobre a morfologia, a anatomia e a composição química. Também geramos 332 novas sequências do espaçador interno transcrito do DNA nuclear (nuITS) e 97 novas sequências do gene codificador da proteína beta tubulina (β-tubulin) para os micobiontes, e cinco novas sequências do gene codificador da proteína actina I (ACT1) e dez da região 16S do DNA ribossômico (16S rDNA) para o clorobionte e o cianobionte de S. alpinum, respectivamente, totalizando 444 novas sequências geradas. Foram identificadas 22 espécies de Stereocaulon, sendo sete para as altas latitudes do sul da América do Sul na Argentina e Chile, três para a Antártica, quatro para os campos de altitude no Brasil e 17 para os páramos andinos da Colômbia. Stereocaulon alpinum foi caracterizada, descrita e confirmada como espécie bipolar. Para os campos de altitude no Brasil, S. vesuvianum representa um novo registro para território brasileiro. Neste estudo, percebemos que em alguns casos, as descrições encontradas na literatura não abrangem nem refletem a variabilidade morfológica encontrada nas espécies. Descrições sobre a morfologia, anatomia e química são de grande importância para a circunscrição de cada espécie, que se vê refletida e comprovada nas análises moleculares. As ferramentas moleculares são imprescindíveis para realizar análises integrativas que permitam um melhor entendimento da sistemática do gênero.
Palavras-chave: filogenia, fungos, simbiose, taxonomia. |
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| TAXONOMIA INTEGRATIVA EM LIQUENS PARMELIOIDES (PARMELIACEAE) DO BRASIL |
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| Curso |
Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade |
| Tipo |
Tese |
| Data |
08/12/2023 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
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| Banca |
- Adriano Afonso Spielmann
- Aline Pedroso Lorenz
- Flavio Macedo Alves
- Gecele Matos Paggi
- Natália Mossmann Koch
- PRISCILA CANESQUI DA COSTA
- Wellington Santos Fava
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| Resumo |
Fungos liquenizados compreendem diferentes organismos funcionando como um ecossistema autossustentável, uma complexa forma de vida mutualística benéfica entre fungos, algas verdes e/ou cianobactérias, além de outros microrganismos. Possuem mais de 19 mil espécies conhecidas, sendo Parmeliaceae a mais diversa. Ela é dividida em duas subfamílias: Protoparmelioideae e Parmelioideae. Esta última, ainda é subdividida informalmente em sete clados, sendo que o clado Parmelioide, com representantes predominantemente foliosos, agrupa cerca de 67% da diversidade da família. Por muitos anos os liquens têm sido identificados baseado apenas em características morfológicas, mas com adventos moleculares, novas ferramentas para identificação desses organismos têm ganhado espaço, como o uso do DNA barcoding, e mais atualmente a associação desse com a taxonomia integrativa. Esta abordagem tem como objetivo utilizar diferentes fontes de dados para a identificação e/ou delimitação específica, e tem mostrado alta eficiência nos resultados obtidos. Assim, nosso estudo tem como objetivo utilizar a abordagem integrativa e o DNA barcoding (baseado no marcador nuITS) nas espécies do clado Parmelioide de Parmeliaceae de algumas localidades do Brasil. No primeiro capítulo, realizamos a combinação das espécies Canoparmelia amazonica e Myelochroa lindmanii no gênero Parmelinella. Confirmamos o posicionamento dessas espécies através da filogenia molecular (nuITS), propondo assim, a combinação de ambas sob o gênero Parmelinella. Além disso, também fornecemos descrições morfológicas e químicas e imagens, subsidiando a nova classificação. No segundo artigo propomos Hypotrachyna neohorrescens como nova espécie (subgênero Parmelinopsis). Hypotrachyna neohorrescens é proximamente relacionada com H. mcmulliniana, porém com baixa, utilizando apenas o marcador nuITS. A distinção filogenética de ambas só foi possível com marcadores concatenados (nuITS+mtSSU). Morfologicamente as espécies também apresentam diferenças sutis. Além disso, não encontramos diferenças morfológicas e químicas entre Hypotrachyna neohorrescens e H. horrescens, mas geneticamente, possuem grande divergência, sendo, portanto, consideradas espécies crípticas. No terceiro e último capítulo realizamos a identificação integrativa de 90 espécimes de liquens coletados no extremo sul do Brasil. Inicialmente fizemos a identificação morfológica, encontrando 39 morfoespécies. Com a identificação molecular baseada em DNA barcoding (marcador nuITS), utilizando o BLASTn para verificar as espécies mais próximas das sequências, e, posteriormente, reconstruímos as filogenias por gênero e usando como sequências de referências aquelas disponíveis no banco de dados público – GenBank. Baseado nos resultados das três abordagens (DNA barcoding, análises do BLASTn e filogenia), entre as 39 morfoespécies, 22 continham sequências homônimas, ou seja, sequências com mesmo nome no banco de dados GenBank. Todavia os resultados das filogenias mostraram que 20 morfoespécies agruparam com sequências de mesma identidade, mas 10 delas apresentaram também diferentes espécies nos clados. Entre as 17 morfoespécies sem sequência homônimas, somente seis mostraram ser geneticamente distintas das demais sequências do GenBank, enquanto as demais apresentaram alguma incongruência entre as abordagens. Encontramos pelo menos 22 casos de possíveis complexos de espécies em nossos dados, os quais não foram solucionados utilizando apenas o marcador nuITS. Nossos resultados corroboram com estudos recentes, os quais destacam a falta de resolução do marcador nuITS em complexos de espécies. Tornando assim a tarefa de usar apenas DNA barcoding como ferramenta de identificação específica ainda mais desafiadora. |
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| Potencial anti-inflamatório, antimicrobiano e antibiofilme de Miconia albicans |
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| Curso |
Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade |
| Tipo |
Tese |
| Data |
24/03/2023 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
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| Banca |
- Ana Camila Micheletti
- Denise Brentan da Silva
- Nadla Soares Cassemiro
- Saulo Euclides Silva Filho
- Thalita Bachelli Riul
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| Resumo |
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| POTENCIAL ANTI-INFLAMATÓRIO, ANTIMICROBIANO E ANTIBIOFILME DAS FOLHAS DE MICONIA ALBICANS (MELASTOMATACEAE) |
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| Curso |
Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade |
| Tipo |
Tese |
| Data |
24/03/2023 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
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| Coorientador(es) |
- Monica Cristina Toffoli Kadri
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| Orientando(s) |
- Djaceli Sampaio de Oliveira Dembogurski
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| Banca |
- Ana Camila Micheletti
- Denise Brentan da Silva
- Lilliam May Grespan Estodutto da Silva
- Nadla Soares Cassemiro
- Saulo Euclides Silva Filho
- Thalita Bachelli Riul
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| Resumo |
Miconia albicans (Melastomataceae) é conhecida popularmente pelo nome canela de velho e suas folhas são utilizadas em forma de chá para tratar principalmente inflamações e dores articulares. No entanto, escassas evidências científicas avaliam o potencial anti-inflamatório in vivo correlacionado ao perfil químico e a variação sazonal de seus constituintes. Com isso, foi obtido um extrato aquoso das folhas de M. albicans (MAAE), similar ao utilizado pela população, e o mesmo foi submetido a ensaios de inflamação, analgesia e toxicidade. MAAE exibiu na dose de 256 mg/kg, uma inibição do efeito edematogênico nos animais tratados, assim como uma redução da migração leucocitária, diante a resposta inflamatória aguda. As contorções abdominais induzidas por ácido acético foram reduzidas no tratamento com MAAE no teste de nocicepção, bem como o tempo de lambida de pata, mostrando um potencial nociceptivo. MAAE não provocou efeitos toxicológicos nos ensaios de toxicidade aguda e de doses repetidas. Os animais não apresentaram alterações quando analisados os parâmetros bioquímicos, histológicos e hematológicos. A atividade antimicrobiana e antibiofilme de MAAE e 4 frações foram avaliadas frente as bactérias Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa, onde todas as amostras submetidas não apresentaram atividade eficaz contra as cepas patogênicas. A análise fitoquímica feita pela técnica de CLAE-DAD-EM, possibilitou anotar vinte e quatro compostos a partir do MAAE, como megastigmanos, flavonoides, elagitaninos e triterpenos, destacando que essas classes de metabólitos são reconhecidas por seu potencial anti-inflamatório. Na investigação sazonal, 4 indivíduos da mesma espécie foram monitorados durante 10 meses, dessa forma, observou-se que as estações seca e chuvosa interferem na produção de metabólitos secundários da planta. Sendo observado que as classes de flavonoides e megastigmanos ocorrem com maior intensidade no período de seca, enquanto os taninos ocorrem mais intensamente em estação chuvosa. Neste trabalho, a classe dos megastigmanos foram identificados pela primeira vez no gênero Miconia, assim como não haviam informações na literatura inferindo a variação sazonal relacionada a esses compostos. |
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| Senecavirus A - Uma abordagem biotecnológica para a vigilância em doenças vesiculares |
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| Curso |
Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade |
| Tipo |
Dissertação |
| Data |
09/12/2022 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
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| Banca |
- Edgar Julian Paredes Gamero
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| Resumo |
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| Download |
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| Senecavirus A - Uma abordagem biotecnológica para a vigilância em doenças vesiculares |
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| Curso |
Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade |
| Tipo |
Dissertação |
| Data |
09/12/2022 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
- Edgar Julian Paredes Gamero
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| Coorientador(es) |
- Lenita Ramires dos Santos
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| Orientando(s) |
- Juliana da Silva Gomes Rieger
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| Banca |
- Cleber Eduardo Galvão Carvalho
- Cynthia Mantovani
- Edgar Julian Paredes Gamero
- Flábio Ribeiro de Araújo
- Ingrid Batista Pinto
- Lenita Ramires dos Santos
- Sebastiao Martins de Souza Neto
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| Resumo |
RIEGER, Juliana. S.G., Universidade Federal do Mato Grosso do Sul, Dezembro, 2022. Senecavirus A – Uma abordagem biotecnológica para a vigilância em doenças vesiculares. Orientador: Dr. Edgar Julian Paredes Gamero. Co-Orientadora: Dra. Lenita Ramires dos Santos. Senecavirus A (SVA) é um vírus não envelopado, RNA de fita simples de senso positivo do gênero Senecavirus, família Picornaviridadae. Este vírus causa doença vesicular em suínos, clinicamente indistinguível de outras doenças, tal como febre aftosa, doença vesicular de suínos, estomatite vesicular e exantema vesicular de suínos. Os principais sinais clínicos são lesões vesiculares em suínos e morte em leitões. No Brasil, surtos foram reportados inicialmente no final de 2014, e desde então, tem causado prejuízos na suinocultura, principalmente devido a doença possuir similaridade com febre aftosa, uma doença devastadora na suinocultura e de grande importância econômica. Diante desse cenário, se faz necessário o aprimoramento de testes diagnósticos. Neste estudo, a proteína recombinante viral 2 (VP2) foi produzida para o desenvolvimento de um ensaio ELISA indireto para identificar a presença e níveis de anticorpos contra SVA em propriedades brasileiras de produção de suínos. Valores de sensibilidade e especificidade do ELISA baseado em VP2 foram determinados utilizando a análise da curva ROC com 43 amostras de soro positivas e 219 amostras negativas. Adicionalmente, amostras de soro de suínos imunizados com oito distintas cepas brasileiras de SVA inativadas (MF615501, MF615502, MF615503, MF615505, MF615506, MF615507, MF615509 e MZ456812) foram testadas com o ELISA. A reação cruzada com estomatite vesicular foi testada utilizando soro de 17 suínos naturalmente infectados e positivos para esta doença. Como resultado, o ELISA baseado em VP2 apresentou 100% de especificidade e 74,4% de sensibilidade. Na fase aguda da doença, a sensibilidade do teste foi de 100% e 9 meses após o início dos sinais clínicos a sensibilidade do teste diminuiu para 73.35%. O ELISA desenvolvido neste estudo foi capaz de detectar anticorpos específicos em soro de suínos que receberam três das oito cepas brasileiras inativadas. Adicionalmente, possibilitou a detecção de anticorpos de SVA de animais na fase aguda e crônica e não apresentou reação cruzada com estomatite vesicular. Este ensaio é uma ferramenta útil no monitoramento e diagnóstico da doença.
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| Download |
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| Avaliação do efeito cardioprotetor do extrato aquoso das folhas de Rudgea virbunoides benth. em ratos com hipertensão renovascular |
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| Curso |
Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade |
| Tipo |
Tese |
| Data |
26/11/2021 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
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| Banca |
- Bruna Paola Murino Rafacho
- Denise Brentan da Silva
- Eduardo Benedetti Parisotto
- Lais Alves de Souza Bonilha
- Monica Cristina Toffoli Kadri
- Priscila de Souza
- Saulo Euclides Silva Filho
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| Resumo |
A hipertensão arterial sistêmica (HAS) consiste numa condição clínica multifatorial
caracterizada por níveis elevados e sustentados de pressão arterial. É também o principal
fator de risco para as alterações funcionais e/ou estruturais dos órgãos alvo e as alterações
metabólicas, com consequente aumento do risco de eventos cardiovasculares fatais e não
fatais. O tratamento para o controle da HAS inclui ações de mudança de estilo de vida e
utilização de medicamentos, como diuréticos, simpaticolíticos, vasodilatadores,
bloqueadores de canais de cálcio, inibidores da enzima conversora de angiotensina e
bloqueadores do receptor de angiotensina II. Neste contexto, insere-se também o
tratamento com administração de fitoterápicos ou a utilização de plantas medicinais em
formas de chás, infusão e macerações. Sabe-se, que algumas substâncias químicas
presentes em determinadas plantas são associadas com a prevenção ou tratamento das
doenças cardiovasculares (DCV), por exemplo Rudgea viburnoides (Cham.) Benth. é
pertencente a família Rubiaceae, popularmente conhecida como congonha, congonha-de-
bugre ou bugre e utilizada na medicina tradicional sob a forma de chá, devido suas
propriedades antirreumáticas, diuréticas, hipotensoras e depurativas do sangue . Ela é uma
espécie comum do Cerrado e potencial diurético e antioxidante já descritos. O objetivo
desse estudo foi avaliar os efeitos da administração prolongada do extrato aquoso obtido
de folhas de Rudgea Viburnoides (Cham.) Benth. (EARV) no comprometimento do
estresse oxidativo, disfunção renal e dano cardiovascular em ratos hipertensos 2K1C. Além
disso, também determinar a composição química de EARV através de cromatografia
líquida de alta eficiência acoplada ao detector de arranjo de diodos e espectrometria de
massas (CLAE-DAD-EM). Para tal, o EARV foi obtido através de extração acelerada com
solvente e este extrato foi analisado por CLAE-DAD-EM. Além disso, também foi
realizado teste de toxicidade aguda em ratos Wistar fêmeas. Foi induzida cirurgicamente,
em ratos Wistar machos, a hipertensão renovascular (dois rins, modelo de um clipe). O
EARV foi administrado por via oral nas doses de 30, 100 e 300 mg / kg, diariamente
durante 28 dias, por 5 semanas após a cirurgia. Nos dias 1, 7, 14, 21 e 28 a função renal foi
avaliada por análise de volume e parâmetros urinários, bem como eletrólitos urinários, pH
e densidade. No 29° dia, por eletrocardiografia, foram registradas a pressão arterial e a
frequência cardíaca. Também foram obtidas amostras de sangue para avaliação da
atividade da enzima conversora de angiotensina plasmática e mensuração sérica de Na+,
K+, uréia e creatinina. Posteriormente, foram isolados respectivamente, os leitos vasculares
mesentérico e tecido cardíaco para morfometria cardíaca e avaliação da reatividade
vascular. Ao final, foram coletadas para avaliação do estresse oxidativo tecidual, amostras
da aorta, coração e rim. Através das análises por CLAE-DAD-EM, os compostos
identificados em no EARV foram ácido quínico, bem como ácidos clorogênicos, um
iridóide glicosilado, flavonóis O-glicosilados, saponinas e um triterpenos. Na avaliação da
toxicidade aguda, não foi observado nenhum sinal após o tratamento com dose única de
EARV. O tratamento prolongado com EARV em ratos hipertensos foi capaz de preservar
a excreção urinária e os níveis de eletrólitos (Na+, K+, Ca2+ e Cl-) de maneira semelhante
ao grupo operado por Sham (controle negativo). Adicionalmente, o tratamento prolongado
com EARV foi capaz de reverter as alterações eletrocardiográficas, o aumento da pressão
arterial e da frequência cardíaca em ratos hipertensos 2K1C, bem como reverter a
hipertrofia ventricular esquerda e as alterações na reatividade vascular induzidas pela
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hipertensão. Assim, esse efeito foi associado a uma modulação positiva do estresse
oxidativo tecidual, ativação da via NO/cGMP e inibição da enzima de conversão da
angiotensina, o que indica um potencial mecanismo para os efeitos renais e
cardiovasculares de AERV. Assim, pode-se dizer que o tratamento de 28 dias com AERV
reduziu a progressão da doença cardiorrenal em ratos hipertensos 2K1C. |
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| Monitoramento da cepa vacinal Brucella abortus B19 em bezerras: positividade no período pré vacinação |
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| Curso |
Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade |
| Tipo |
Tese |
| Data |
16/10/2020 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
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| Banca |
- Carina Elisei de Oliveira
- Cleber Eduardo Galvão Carvalho
- Cristiano Marcelo Espinola Carvalho
- Grácia Maria Soares Rosinha
- Sebastiao Martins de Souza Neto
- Vanessa Felipe de Souza
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| Resumo |
A brucelose bovina é uma doença zoonótica que tem grande impacto econômico no mercado de produtos de carne e leite. Como o Brasil possui um dos maiores rebanhos bovinos do mundo, essa doença é um importante problema de saúde pública. Em 2001, foi lançado o Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose Animal (PNCEBT), o qual foi revisado em 2017. Este programa incluiu a vacinação de bezerras com idade entre 3-8 meses com a vacina B19, uma cepa lisa atenuada, e o monitoramento com base em testes sorológicos. Algumas pesquisas relatam a persistência e excreção da cepa B19. Nesse contexto, objetivou com este estudo monitorar a persistência da cepa vacinal em amostras de sangue de 10 bezerras vacinadas com idade entre 6-8 meses e investigar a soroconversão com o intuito de verificar a imunogenicidade da vacina. A Reação em Cadeira de Polimerase (PCR) foi realizada em diferentes períodos de tempo: “dia zero” (antes da vacinação), 1 a 15 dias após a vacinação e mensalmente até completar 12 meses, totalizando 28 coletas. A positividade da cepa vacinal ocorreu ao longo do estudo, mesmo no dia zero, antes das bezerras serem vacinadas. O sequenciamento confirmou a presença da cepa vacinal B19. Com base no teste sorológico Antígeno Acidificado Tamponado (AAT), não houve aglutinação nas amostras do “dia zero”, portanto a resposta imune foi negativa. Esta resposta começou a partir do quarto dia após a vacinação com duas amostras positivas e, todas as amostras ficaram positivas a partir do sétimo dia. É possível concluir que a técnica de PCR foi capaz de detectar a cepa B19 presente em uma quantidade antes da vacinação, a qual não é suficiente para induzir uma resposta imune, mas a cepa está presente. Uma hipótese que poderia explicar essa positividade antes da vacinação, é que as mães já vacinadas poderiam ter transmitido a cepa vacinal para as bezerras, pois possivelmente apresentavam excreção da cepa B19 no leite e/ou urina. Este é o primeiro relato sobre a presença da cepa vacinal contra brucelose bovina no sangue de bezerras antes da vacinação. |
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| Isolamento de fungos endofíticos de Acrocomia aculeata (Jacq.) Lodd. ex Mart. e avaliação do potencial biocida |
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| Curso |
Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade |
| Tipo |
Tese |
| Data |
05/10/2020 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
- Maria Ligia Rodrigues Macedo
|
| Coorientador(es) |
|
| Orientando(s) |
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| Banca |
- Ana Cristina Jacobowski
- Caio Fernando Ramalho de Oliveira
- Janaina de Cassia Orlandi Sardi
- Maria Ligia Rodrigues Macedo
- Mayara de Souza Rodrigues
- Priscila Aiko Hiane Siroma
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| Resumo |
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| Desenvolvimento de Lactobacillus produtores de peptídeos antimicrobianos: uma nova estratégia no desenvolvimento de terapias nutricionais enterais e Avaliação de peptídeos mastoparanos otimizados com rápido potencial bactericida e propriedades antibiofilme |
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| Curso |
Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade |
| Tipo |
Tese |
| Data |
23/09/2020 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
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| Banca |
- Alda Maria Teixeira Ferreira
- Antonia Railda Roel
- Carina Elisei de Oliveira
- Gisele Regina Rodrigues
- Grácia Maria Soares Rosinha
- Isabel Cristina Marques Fensterseifer
- Sonia Alexandra Leite Velho Mendo Barroso
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| Resumo |
A resistência bacteriana frente aos antibióticos convencionais representa um enorme problema no tratamento de infecções por bactérias e biofilmes principalmente para países em desenvolvimento. No presente estudo propusemos a recombinação heteróloga de estirpes Lactobacillus rhamnosus GG e os peptídeos antimicrobianos clavanina MO e IDR-1018, através de um sistema de clonagem de integração/depuração. Em adição, também avaliamos as atividades antibacteriana e antibiofilme, bem como as estruturas secundárias de um peptídeo natural, denominado mastoparan-L, e suas variantes otimizadas, incluindo mastoparan-R1 e [I5, R8]-MP. Como primeira etapa desta tese, foram caracterizadas as atividades antimicrobianas dos peptídeos clavanina MO e IDR-1018 (entre 16 μg.ml-1 e 64 μg.ml-1) perante as bactérias patogênicas. Ademais, estes mesmos peptídeos não apresentaram atividade contra L. rhamnosus GG viabilizando, assim, usar esse microrganismo como sistema de expressão heteróloga. Os plasmídeos incorporados por eletroporação em Escherichia coli apresentaram perfil de bandas distintas dos plasmídeos originais pEM 76, pEM 181, pEM 181-clavMO, exceto para pEM 94. Entretanto, não houve a digestão por enzimas de restrição nos plasmídeos pEM 76, pEM 181, pEM 181-clavMO derivados da miniprep.. Adicionalmente a fim de avaliar o sinergismo entre PAMs e o L. rhamnosus GG foi empregue um ensaio (spot test) no qual consiste do meio ágar Soft sobresposto ao ágar De Man, Rogosa e Sharp (MRS). Os halos de inibição do Lactobacillus isolado ou associado aos PAMs demonstram efetiva inibição frente a bactérias patogênicas. Ademais outro estudo incluindoo peptídeo [I5, R8]-MP demonstrou as propriedades antibacterianas mais promissoras, causando ainda morte celular entre 10 e 50 min de tratamento in vitro. Além disso, esse peptídeo inibiu em mais de 90% a formação de biofilmes de Escherichia coli e Enterobacter cloacae nas concentrações de 4 e 2 μM, respectivamente. Os estudos de espectroscopia de dicroísmo circular (DC) e dinâmicas moleculares sugerem que os mastoparanos analisados adotaram estrutura em α-hélice na presença de micelas aniônicas. Portanto, presume-se que os plasmídeos utilizados foram incorporados ao cromossomo da bactéria E. coli por apresentarem regiões integrativas homólogas aos Lactobacillus. Em relação aos ensaios do spot test não foi possível afirmar que os efeitos antibacterianos foram potencializados pela interação entre os PAMs e o L. rhamnosus GG. Por fim, o peptídeo [I5, R8]-MP demonstrou potente atividade antibacteriana e antibiofilme. Assim, esses resultados sugerem que Lactobacillus e PAMs podem interagir simultaneamente, preservando as características antibacterianas de ambos. Entretanto, testes adicionais devem ser conduzidos incluindo reavaliar o uso do vetor de expressão e elucidar os mecanismos de ação dos PAMs estudados frente a bactérias patogênicas. |
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| Síntese e determinação das propriedades farmacológicas do (E)-2 (((4-nitrofenil)imino)metil)fenol |
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| Curso |
Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade |
| Tipo |
Tese |
| Data |
17/08/2020 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
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| Banca |
- Ângela Alves Nunes
- Cristiano Marcelo Espinola Carvalho
- Danieli Fernanda Buccini
- Luana Silva Soares
- Nelson Luis de Campos Domingues
- Susana Elisa Moreno
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| Resumo |
A inflamação é um evento que ocorre em tecidos vascularizados e que tem por finalidade eliminar patógenos visando a homeostase do organismo. Ela envolve uma variedade de células e mediadores inflamatórios que, ao final permitem ao tecido sua completa restauração. Quando o balanço entre inflamação e reparo tecidual é quebrado, há o desenvolvimento de doenças inflamatórias crônicas, como por exemplo, câncer, artrite, asma, entre outros. Uma estratégia para o desenvolvimento de novos anti- inflamatórios é o desenho racional de fármacos por meio da química sintética, tendo em vista a possibilidade de maior efetividade e a redução dos efeitos adversos. As iminas surgem nesse cenário, como compostos sintéticos com várias aplicações na área biológica. Também chamadas de Bases de Schiff, são compostos que possuem o grupo funcional (–C=N–), e tem ganhado importância nas áreas médica e farmacêutica devido a suas atividades relatadas na literatura, como atividade antitumoral, analgésica, anti-inflamatória, nematicida, entre outras. Visando a busca de novos fármacos, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a anti-inflamatória da imina (E)-2-(((4-nitrofenil)imino)metil)fenol. A citotoxicidade foi avaliada pelos ensaios de hemólise e MTT. A genotoxicidade foi avaliada pelo ensaio de micronúcleos. Para avaliar a
atividade anti-inflamatória foram realizados os ensaios de migração de neutrófilos, edema de pata, exsudação pelo azul de evans. A produção de óxido nítrico foi quantificada in vitro e in vivo. Os resultados demonstraram que o composto não apresentou atividade hemolítica em eritrócitos murinos nas concentrações de 100, 50, 25, 12.5, 6.25µg/mL. Em relação à viabilidade celular, o composto, em diferentes concentrações, não alterou a viabilidade de macrófagos em 24 e 48 horas de exposição. O composto também não induziu atividade genotóxica in vivo. A migração de neutrófilos mostrou que o composto reduziu em cerca de 60% o número de leucócitos
totais e de neutrófilos emigrados para a cavidade peritoneal de camundongos. O ensaio de edema de pata demonstrou que o composto reduziu a formação de edema em todos os tempos mensurados. Essa atividade anti-exsudativa foi comprovada pelo ensaio de
permeabilidade de azul de Evans. O composto também diminuiu a produção de óxido nítrico, resultado confirmado nos testes de quantificação de nitrito in vitro e in vivo. Os resultados mostraram que o composto (E)-2-(((4-nitrofenil)imino)metil)fenol possui atividade anti-inflamatória promissora e que consiste num potencial candidato para o desenvolvimento de novas drogas anti-inflamatórias. |
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| Desenho racional de novos peptídeos antimicrobianos a partir de sequência primária de proteína de inseto |
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| Curso |
Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade |
| Tipo |
Tese |
| Data |
15/06/2020 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
- Maria Ligia Rodrigues Macedo
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
- Amanda Carolina Borges da Silva
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| Banca |
- Ana Cristina Jacobowski
- Edgar Julian Paredes Gamero
- Eduardo Benedetti Parisotto
- Gecele Matos Paggi
- Janaina de Cassia Orlandi Sardi
- Juliano de Carvalho Cury
- Maria Ligia Rodrigues Macedo
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| Resumo |
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| Download |
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| Detecção de Eventos de Transferência Horizontal de Genes usando Regiões Anômalas, Famílias de Proteínas e Reconciliação de Árvores |
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| Curso |
Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade |
| Tipo |
Tese |
| Data |
08/04/2020 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
- Nalvo Franco de Almeida Junior
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
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| Banca |
- Edson Norberto Caceres
- Flábio Ribeiro de Araújo
- Henrique Mongelli
- Luciana Montera Cheung
- Maria Ligia Rodrigues Macedo
- Nalvo Franco de Almeida Junior
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| Resumo |
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| Download |
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| Filogeografia e diversidade genética de Aechmea distichantha Lem. (Bromeliaceae): Implicações evolutivas e conservacionistas |
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| Curso |
Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade |
| Tipo |
Tese |
| Data |
27/03/2020 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
- Fernanda Maria de Russo Godoy
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| Banca |
- Aline Pedroso Lorenz
- Denise Brentan da Silva
- Gecele Matos Paggi
- Gustavo Hassemer
- Marcos Junji Kitaura
- Wellington Santos Fava
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| Resumo |
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| Download |
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| Propriedades do óleo bruto da semente de Campomanesia adamantium (Cambess.) O. Berg |
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| Curso |
Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade |
| Tipo |
Tese |
| Data |
21/02/2020 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
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| Banca |
- Arnildo Pott
- Danielle Bogo
- Juliana Rodrigues Donadon
- Lincoln Carlos Silva de Oliveira
- Priscila Aiko Hiane Siroma
- Rosani do Carmo de Oliveira Arruda
- Valdemir Antônio Laura
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| Resumo |
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| Atividade antitumoral in vitro de peptídeos Butylatus inspirados no veneno de Tityus serrulatus (Scorpiones) |
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| Curso |
Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade |
| Tipo |
Tese |
| Data |
29/08/2019 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
- Cristiano Marcelo Espinola Carvalho
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
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| Banca |
- Antonia Railda Roel
- Cristiano Marcelo Espinola Carvalho
- Ludovico Migliolo
- Renata Trentin Perdomo
- Rodrigo Juliano Oliveira
- Susana Elisa Moreno
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| Resumo |
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| Estudo comparativo de vacinas de DNA contra Brucella abortus nas estratégias DNA Prime-Protein Boost e encapsulação em nanopartículas de quitosana |
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| Curso |
Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade |
| Tipo |
Tese |
| Data |
21/08/2019 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
- Grácia Maria Soares Rosinha
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
- Marrielen Aparecida Benites Caitano Bertolacci
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| Banca |
- Carina Elisei de Oliveira
- Cleber Eduardo Galvão Carvalho
- Cristiano Marcelo Espinola Carvalho
- Grácia Maria Soares Rosinha
- Sebastiao Martins de Souza Neto
- Vanessa Felipe de Souza
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| Resumo |
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| Identificação de Mycobacterium bovis por espectometria de massas MALDI-TOF em bovídeos |
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| Curso |
Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade |
| Tipo |
Tese |
| Data |
08/08/2019 |
| Área |
BIOTECNOLOGIA |
| Orientador(es) |
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
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| Banca |
- Carlos Alberto do Nascimento Ramos
- Cristiano Marcelo Espinola Carvalho
- Cristina Pires de Araujo
- Daniele Bier Borges
- Flábio Ribeiro de Araújo
- Klaudia dos Santos Goncalves Jorge
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| Resumo |
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