| Efeitos de compostos citotóxicos de lauráceas na indução de apoptose e na expressão de genes em células neoplásicas in vitro |
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| Curso |
Mestrado em Bioquímica e Biologia Molecular |
| Tipo |
Dissertação |
| Data |
18/05/2018 |
| Área |
BIOLOGIA GERAL |
| Orientador(es) |
- Maria de Fatima Cepa Matos
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
- Kamylla Fernanda Souza de Souza
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| Banca |
- Alda Maria Teixeira Ferreira
- Caio Fernando Ramalho de Oliveira
- Maria de Fatima Cepa Matos
- Priscila de Matos Candido Bacani
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| Resumo |
Mezilaurus crassiramea e Aniba heringeri (Lauraceae), plantas encontradas no Cerrado de Mato Grosso do Sul, foram estudadas quanto à citotoxicidade em células neoplásicas, devido à demanda por estudos relacionados ao tratamento de câncer. O estudo guiado dos extratos e fases levou ao isolamento de dois compostos: majoranolídeo (butanolídeo) e dímero de desidrogoniotalamina (estiril-pirona), os quais apresentaram forte atividade citotóxica para as linhagens de leucemia promielocítica aguda (HL-60) e de carcinoma de mama triplo-negativo (MDA-MB-231), respectivamente, tornando-se relevante a avaliação dos efeitos que levaram à citotoxicidade nessas linhagens. O objetivo do trabalho foi investigar efeitos apoptóticos e o perfil de expressão de genes integrantes das vias intrínseca (BAX e BCL-2) e extrínseca (caspase-8) da apoptose, bem como de um gene de resistência à apoptose (BIRC-5). Para isso, foi avaliado o efeito de majoranolídeo, em quatro concentrações, no comprometimento da integridade de membrana plasmática (MP) nas células HL-60, através do ensaio de viabilidade celular por 7-AAD. Para quantificar a caspase-3, ativada por dímero de desidrogoniotalamina, em células MDA-MB-231, utilizou-se o anticorpo PE Rabbit Anti-Active caspase-3. A expressão gênica foi analisada nas duas linhagens em estudo, tratadas com seus respectivos compostos, seguindo-se os passos de extração do RNA total, síntese do cDNA e posterior quantificação relativa por PCR em tempo real (RT-qPCR). Os dados de expressão gênica foram normalizados pelo gene constitutivo β-actina e calculados com o software CFX Manager 3.1 (Bio-Rad). Após 48 h de tratamento, o majoranolídeo, na concentração de 50 μM, causou permeabilização de MP em células HL-60, caracterizando inviabilidade/morte celular. Nesse mesmo período, o composto causou up-regulação de BAX e caspase-8 (pró-apoptóticos), além de down-regulação em BIRC-5 (antiapoptótico), sugerindo uma possível ativação das vias intrínseca e extrínseca da apoptose. Para células MDA-MB-231, após 48 horas de tratamento foi encontrada ativação significativa de caspase-3 com dímero de desidrogoniotalamina (63 μM), bem como up-regulação de BAX, sem efeitos significativos para os demais genes em estudo. Os resultados obtidos somam-se aos conhecimentos disponíveis sobre os efeitos citotóxicos dos compostos majoranolídeo e dímero de desidrogoniotalamina em células leucêmicas e de câncer de mama, respectivamente, e impulsionam estudos subsequentes dessas espécies e de outras plantas do Cerrado, na busca de compostos bioativos anticâncer. |
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| Atividade anti Trypanosoma cruzi de Pogonopus tubulosus e Ocotea lancifolia |
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| Curso |
Mestrado em Bioquímica e Biologia Molecular |
| Tipo |
Dissertação |
| Data |
15/02/2018 |
| Área |
BIOLOGIA GERAL |
| Orientador(es) |
- Alda Maria Teixeira Ferreira
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
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| Banca |
- Alda Maria Teixeira Ferreira
- Alessandra Gutierrez de Oliveira
- Fernanda Rodrigues Garcez
- Maria Carolina Silva Marques
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| Resumo |
Trypanosoma cruzi é o agente etiológico da doença de Chagas nas Américas. É responsável por milhares de óbitos a cada ano e incapacita milhares de indivíduos ao trabalho, gerando assim, um grande ônus para o governo com o tratamento dos doentes. Os tratamentos atualmente utilizados são eficazes em 50% dos casos em fase aguda, porém são ineficazes no estágio crônico da doença. Nesse contexto, a utilização de bioensaios permite a detecção da atividade biológica de um extrato vegetal de maneira simples e aponta para estudos em busca de novos compostos com propriedades terapêuticas, além da elucidação de aspectos da biologia básica do parasita. O presente trabalho tem como objetivo a determinação da atividade anti T. cruzi de Pogonopus tubulosus e Ocotea lancifolia. Foram avaliadas a ação de diversos extratos, frações e alcaloides isolados de ambas as plantas frente às formas epimastigotas e amastigotas do parasita, por meio do ensaio do MTS, além da citotoxicidade frente as células Vero, por meio do ensaio do MTT. Além da atividade biológica, foram também elucidados alguns mecanismos de ação de alcaloides de P. tubulosus por meio de ensaios de curva de recuperação, influência no perfil proteico, exposição de Fosfatidilserina, degradação do DNA e ciclo celular. Os resultados indicam a potente ação de P. tubulosus frente as formas epimastigotas e amastigotas do parasita (com valores de IC50 inferiores à da droga controle Benznidazol) além de índices moderados de seletividade. O ensaio de curva de recuperação demonstrou a atividade tripanostática dos alcaloides isolados de P. tubulosus frente ao parasita, sendo corroborados pelos ensaios de exposição de fosfatidilserina e degradação do DNA (indicando ausência de eventos de morte celular), além de uma diminuição geral na síntese proteica. P. tubulosus representa uma promissora fonte de alcaloides com atividade biológica anti T. cruzi. A ausência de morte celular nos tratamentos com os isolados possibilita uma maior facilidade no estudo da biologia básica do parasita, que é de suma importância para o aumento das chances e possibilidades no tratamento da doença. |
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| Purificação e Caracterização Bioquímica das Amilases Produzidas por Aspergillus sp. e Neurospora crassa exo-1: imobilização da enzima em alginato de sódio |
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| Curso |
Mestrado em Bioquímica e Biologia Molecular |
| Tipo |
Dissertação |
| Data |
10/03/2017 |
| Área |
BIOLOGIA GERAL |
| Orientador(es) |
- Giovana Cristina Giannesi
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
- Evelyn de Andrade Salomão
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| Banca |
- Carla Santos de Oliveira
- Fabiana Fonseca Zanoelo
- Giovana Cristina Giannesi
- Jeandre Augusto Otsubo Jaques
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| Resumo |
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| Produção, Caracterização bioquímica e Aplicação de Proteases produzidas por Fungos Filamentosos |
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| Curso |
Mestrado em Bioquímica e Biologia Molecular |
| Tipo |
Dissertação |
| Data |
09/09/2016 |
| Área |
BIOLOGIA GERAL |
| Orientador(es) |
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
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| Banca |
- Douglas Chodi Masui
- Fabiana Fonseca Zanoelo
- Giovana Cristina Giannesi
- Newton Valério Verbisck
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| Resumo |
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| Purificação e Caracterização bioquímica da xilanase produzida por Aspergillus japonicus e Imobilização em alginato |
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| Curso |
Mestrado em Bioquímica e Biologia Molecular |
| Tipo |
Dissertação |
| Data |
31/08/2016 |
| Área |
BIOLOGIA GERAL |
| Orientador(es) |
- Giovana Cristina Giannesi
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| Coorientador(es) |
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| Orientando(s) |
- Patrícia Oliveira da Silva
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| Banca |
- Denis Pires de Lima
- Douglas Chodi Masui
- Fabiana Fonseca Zanoelo
- Giovana Cristina Giannesi
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| Resumo |
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